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科研速递 | 菅凤增团队关于脊髓空洞系列研究取得重要进展:首个脊髓空洞单细胞RNA-seq“航拍”图
脊髓空洞是一种常见的临床疾病,其病因涵盖广,包括脊髓蛛网膜炎、脊髓损伤、髓内肿瘤以及脊柱畸形、退变等,但大多涉及脑脊液循环障碍。关于其形成和进展机制以及实质内继发性脊髓损伤如何发展,目前仍存在较多争议。除手术减压以外尚无明确、有效的治疗方式。这一中枢神经系统疾病的不良转归困扰众多患者已久,被学术界普遍定性为一类最难以攻克的慢性进行性脊髓损伤。[1]
近日,首都医科大学宣武医院神经外科(中国国际神经科学研究所China-INI)神经脊柱中心菅凤增团队,就脊髓空洞形成与相关脊髓损伤机制的系列研究于2023年4月28日,5月11日,5月29日,分别在神经科学系列杂志Experimental Neurology(IF=5.521,JCR Q2);Cell旗下子刊IScience(IF=6.233,JCR=Q1),以及生物学期刊Cell & Bioscience(IF=9.597,JCR=Q1),连续刊登三篇系列文章。
近年,China-INI神经脊柱中心与脊髓损伤重建&修复实验室,在脊髓空洞相关脊髓损伤机制与临床方面的研究体系逐渐形成,根据全球web of science大数据检索引擎,以“脊髓空洞”(syringomyelia)为检索词获取的大数据研究文献影响力指数(近五年,2023.6.10更新),菅凤增教授团队贡献力居首位,与欧美等国家医学中心团队开展后续深入交流合作,神经脊柱中心也将启动后续脊髓损伤修复相关的基础与临床转化。
研究Ⅰ:Impairment of Connexin 43 may initiate cilia decline in syringomyelia.
DOI: 10.1016/j.expneurol.2023.114430(第一作者:王心宇 硕士;通讯作者:菅凤增 教授)
研究Ⅱ:Single-cell transcriptomics reveals ependymal subtypes related to cytoskeleton dynamics as the core driver of syringomyelia pathological development.
DOI: 10.1016/j.isci.2023.106850(第一作者:卢春李 博士;Leader通讯作者:菅凤增 教授)
研究Ⅲ:Suppression of TGFβR-Smad3 pathway alleviates the syrinx induced by syringomyelia.
DOI: 10.1186/s13578-023-01048-w(第一作者:刘素梅 博后;共同通讯作者:菅凤增 教授)
补充图示:全球脊髓空洞研究Top作者文献引用网络(web of science,2023.6.10更新)
研究Ⅰ是针对脊髓空洞形成与进展机制展开的探究:室管膜纤毛在调控脑脊液(CSF)循环中起到重要作用,而室管膜纤毛的维持依赖于室管膜细胞之间的连接蛋白43(Cx43,缝隙连接的主要成分)以及室管膜表面的肌动蛋白网络的保护。就脊髓空洞中室管膜纤毛脱落的潜在机制,研究Ⅰ得出以下重要结论:
1.SEM和IF结果显示,根据中央管中纤毛的数量减少情况,空洞的发展过程可分为两个阶段(早期,术后7天;晚期,术后14、28天)。纤毛的数量在空洞发展的早期和晚期之间有统计学差异。
2.TEM结果提示,压迫部位室管膜细胞间的缝隙连接在空洞早期就已消失,持续到空洞晚期,IF结果显示,空洞早期至晚期压迫部位的室管膜细胞间Cx43减少。
3.此外,在空洞发展晚期,作者通过IF发现肌动蛋白网络的破坏和中心粒的减少。后续单细胞分析结果与其相互印证。
研究Ⅰ创新和亮点在于明确了脊髓空洞症发展的早期阶段,压迫部位Cx43的损伤可能破坏了室管膜细胞间通讯,从而导致的头侧邻近节段纤毛无法维持,从而减少。早期纤毛减少会导致肌动蛋白网络破坏,进而导致中心粒暴露在CSF的剪应力下,使纤毛进一步减少。
关于脊髓空洞症进展过程中室管膜区域周围存在哪种类型的时空病理改变,尚未得到彻底阐明。近几年,随着转录组学分析的进步,揭示病理过程中各类细胞生物学行为,特别是结合bulk与单细胞RNA-seq。研究Ⅱ与研究Ⅰ在时间序列与相关数据结果上相互印证。
1.研究Ⅱ是全球范围首次对脊髓空洞疾病模型的单细胞RNA时空序列的完整“航拍”图。
2.脊髓中央管周围神经炎症反应以小胶质细胞亚群变化为特征。疾病相关的小胶质细胞(disease associated microglia,DAM)是从单细胞转录组学的角度建立的小胶质细胞亚型,这一亚型在脊髓空洞这类疾病中第一次确立,其意义重大,对于预测脊髓空洞的危险位点至关重要。
3.在其他不同的细胞类型中,室管膜细胞 (EPC)、少突胶质细胞谱系关联密切,进一步证实研究Ⅰ的结论与单细胞转录本完全相对应。特化的EPC纤毛亚群可能是脊髓空洞症发展过程中与肌动蛋白免疫调节和微管细胞骨架动力学相关的重要驱动因素之一。
4.在早期有效减压后,脊髓本身就存在一定的细胞再生潜能,包括纤毛EPC重塑、少突再髓鞘化,以及DAM出现,作为对神经炎症的反应代偿中央管周围的脊髓损伤。而以室管膜纤毛恢复为目标重塑 EPC细胞骨架的有效干预,可能将有助于更好地促进脊髓空洞的进展甚至消退。
进一步解读:
本研究为重塑室管膜小生境以激活脊髓空洞相关脊髓损伤的内源性修复潜力奠定了原型基础,印证了团队前期临床系列研究关于脊髓空洞分类概念中的 “念珠状表型”(Moniliform type)属于早期可逆状态的内在机制。[2,3]通过模拟和描绘脊髓空洞症发展与转归过程中细胞亚群和分子生物标志物的动态变化,为后续研究提供了模板化时空转录本。
中央管周围的室管膜区域是内源性干细胞的小生境(Niche),时空序列所揭示的病理变化也提示脊髓空洞相关脊髓损伤在不同阶段的干预的侧重点似乎完全不同。重塑室管膜细胞骨架以促进运动纤毛再生或许将阻止脊髓空洞症的早期进展;而对于脊髓空洞中后期治疗重点应侧重于抑制周围实质内免疫炎症,为内源性修复创造有利的免疫微环境。
针对脊髓空洞疾病中空洞发生的可能的相关机制研究,研究III首先揭示了脊髓空洞症中中央管扩张的发生机理,并通过抑制TGFβR-Smad3通路减轻了脊髓空洞症引起的中央管扩张。研究显示中央管在扩张的过程中激活中央管内衬的室管膜细胞可能通过随中央管扩张而迁移。
此外,抑制对细胞迁移至关重要的 TGFβR-Smad3信号通路有望可以逆转脊髓空洞造成的中央管扩张,抑制TGFβR-Smad3通路可能起到延缓中央管扩张和脊髓空洞症进展的作用,为临床治疗脊髓空洞症提供了可能。
进一步思考:空洞减少与脊髓空洞症后恢复的相关性
临床上,脊髓空洞症治疗后 MRI 显示空洞大小通常会减小,症状会有所改善;但也有病例显示临床症状会在减压治疗后改善,而空洞无明显变化。即使对空洞进行充分减压,长节段脊髓空洞(holocord syrinx)也可能诱发SCI永久性症状。在研究III中,TGFβR-Smad3 信号的抑制减轻了空洞扩张,但是有可能存在脱靶效应或信号的不完全抑制。将后续在脊髓空洞动物模型[4]验证激活TGFβR-Smad3通路和敲低/敲除TGFβR或Smad3脊髓空洞演变情况。
研究III结果再次表明,脊髓空洞症导致室管膜细胞的激活和中央管隧道状突起的形成,可能是导致其扩张和空洞形成的重要原因。抑制 TGFβR1-Smad3 可减轻脊髓空洞症诱导的中央管扩张,表明 TGFβR1-Smad3 在脊髓空洞症发病机制中的关键作用。
通讯作者介绍
菅凤增 教授 主任医师
中国国际神经科学研究所神经脊柱中心主任,博士生导师
世界神经外科联合会(WFNS)脊柱委员会委员,亚太地区颈椎学会(APCSS)国际执委。中国医师协会神经外科分会脊柱脊髓专家委员会主任委员、中华医学会神经外科分会脊柱脊髓学组副组长、中国医促会骨科分会脊柱内镜专业委员会副主任委员。以通讯作者或第一作者身份在Neurosurgery,Journal of Neurosurgery:Spine,European Spine Journal,Neurospine,Spine,Fluids and Barriers of the CNS,Journal of Pathology,Experimental Neurology,IScience,Cell & Bioscience等期刊发表文章百余篇。相关著作与发明专利近20项,主持脊髓损伤相关国家自然科学基金、国家863合作项目等国家级、省部级课题10余项。
文章第一作者介绍
王心宇
首都医科大学宣武医院21级硕士研究生,导师为菅凤增教授。
研究方向:脊髓空洞症的临床及基础研究,室管膜纤毛在脊髓空洞中的作用及损伤机制。以第一作者在Experimental Neurology,Medical Hypotheses等杂志发表SCI文章。
卢春李
首都医科大学宣武医院21级博士研究生,中共党员,主治医师。
在导师菅凤增教授,王兴文教授,王作伟教授指导下参与脊髓空洞形成及发展病理生理机制研究与脊柱脊髓相关疾病临床研究,以第一作者在Neurospine,Neurosurgery (Oper),Journal of Neuroimmunology,Neurology: Neuroimmunology & Neuroinflammation等期刊发表与接收SCI文章累计12篇。
刘素梅
2014年获得中科院动物所硕士学位,2018年获得中科院遗传所博士学位。
主要研究方向为脊髓损伤相关疾病的发病机制及修复研究,近五年发表文章于Stem Cells International、Neural Regeneration Research、Science China-Life Sciences Science、以通讯作者发表于World Neurosurgery、Mediators of Inflammation等杂志,主持国自然青年基金一项。
文章共同第一作者介绍
蒋川
硕士毕业于英国伦敦国王学院,现于首都医科大学宣武医院神经外科进行住院医师规范化培训,在菅凤增教授指导下进行脊髓空洞症相关的科学研究。研究方向:脊髓空洞症的发病机制,脊髓空洞症中脑脊液循环模式的探究,在投SCI文章2篇。
马龙冰
博士毕业于四川大学华西医学院,首都医科大学宣武医院博士后,宣武医院神经外科住院医师,从事脊髓空洞发病机制与修复研究,以第一作者在Fluids and Barriers of the CNS,Spine Journal杂志发表相关研究文章。
转载自公众号《唯脊柱》
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